Implementación de un método de análisis para la determinación de albúmina sérica humana y bovina por espectroscopia de fluorescencia
Con el objetivo de cuantificar albumina sérica humana (HSA) y bovina (BSA) marcadas y sin marcar se realizaron una serie de ensayos, con el fin de evaluar la utilidad de la espectroscopia de fluorescencia y fluorescencia sincrónica, en la implementación de un método analítico para determinar la conc...
- Autores:
-
Espinosa Calderón, Jenny Carolina
Bonilla Castro, Angela
- Tipo de recurso:
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- Fecha de publicación:
- 2011
- Institución:
- Universidad Industrial de Santander
- Repositorio:
- Repositorio UIS
- Idioma:
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- OAI Identifier:
- oai:noesis.uis.edu.co:20.500.14071/25591
- Palabra clave:
- Espectroscopia De Fluorescencia
Fluorescencia Sincrónica
Albumina Sérica
Fluorescence Spectroscopy
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Serum Albumin.
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Con el objetivo de cuantificar albumina sérica humana (HSA) y bovina (BSA) marcadas y sin marcar se realizaron una serie de ensayos, con el fin de evaluar la utilidad de la espectroscopia de fluorescencia y fluorescencia sincrónica, en la implementación de un método analítico para determinar la concentración de HSA y BSA en medios acuosos, de forma rápida, confiable y económica, análisis de gran importancia en el diagnóstico de enfermedades, así como para muchos otros propósitos. Se prepararon soluciones patrón de BSA por disolución de muestra en agua tipo I junto con los diferentes marcadores. La BSA fue analizada por espectroscopia de absorción UV-Vis, espectroscopia de emisión de fluorescencia y espectroscopia de fluorescencia on curvas de calibración de BSA. La adquisición de espectros de absorción, fluorescencia y fluorescencia sincrónica se realizó utilizando un espectrofotómetro de fluorescencia PTI/QM-40. Este método mostró una excelente exactitud, con un coeficiente de correlación de 0,988. Las desviaciones que se obtuvieron se encuentran por debajo del 5%; éstas se evaluaron mediante diluciones que involucraban el rango de trabajo de la curva estándar. El límite de detección fue de 5,076x10-9 [mol/L] y el límite de cuantificación de 1,692x10-8 [mol/L], parámetros que establecen la sensibilidad del método. Se cuantifico HSA en muestras de suero de siete pacientes sanos en exámenes de rutina como control, aleatoriamente seleccionados en la ciudad de Bucaramanga. De acuerdo con los resultados, se puede afirmar que es posible hacer la cuantificación del contenido de albúmina sérica en distintos medios, utilizando espectroscopia de fluorescencia y fluorescencia sincrónica, mediante las cuales se elimina la interferencia, insensibilidad a la turbidez, ruido de fondo a concentraciones bajas de muestra y en las que no es necesario el uso de marcadores y tratamientos adicionales a la muestra después de su disolución. |
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Se prepararon soluciones patrón de BSA por disolución de muestra en agua tipo I junto con los diferentes marcadores. La BSA fue analizada por espectroscopia de absorción UV-Vis, espectroscopia de emisión de fluorescencia y espectroscopia de fluorescencia on curvas de calibración de BSA. La adquisición de espectros de absorción, fluorescencia y fluorescencia sincrónica se realizó utilizando un espectrofotómetro de fluorescencia PTI/QM-40. Este método mostró una excelente exactitud, con un coeficiente de correlación de 0,988. Las desviaciones que se obtuvieron se encuentran por debajo del 5%; éstas se evaluaron mediante diluciones que involucraban el rango de trabajo de la curva estándar. El límite de detección fue de 5,076x10-9 [mol/L] y el límite de cuantificación de 1,692x10-8 [mol/L], parámetros que establecen la sensibilidad del método. Se cuantifico HSA en muestras de suero de siete pacientes sanos en exámenes de rutina como control, aleatoriamente seleccionados en la ciudad de Bucaramanga. De acuerdo con los resultados, se puede afirmar que es posible hacer la cuantificación del contenido de albúmina sérica en distintos medios, utilizando espectroscopia de fluorescencia y fluorescencia sincrónica, mediante las cuales se elimina la interferencia, insensibilidad a la turbidez, ruido de fondo a concentraciones bajas de muestra y en las que no es necesario el uso de marcadores y tratamientos adicionales a la muestra después de su disolución.PregradoQuímicoIn order to quantify human serum albumin (HSA) and bovine (BSA) marked and unmarked, we have done a series of test to evaluate the usefulness of fluorescence spectroscopy and synchronous fluorescence in the implementation of an analytical method to determine the concentration of HSA and BSA in aqueous media. A fast, reliable and economical analysis is of very important in the diagnosis of diseases as well as for many other purposes. Standard solutions were prepared by dissolving BSA in water sample type I together with the marker. The BSA was analyzed by spectroscopy UV-Vis absorption, fluorescence spectroscopy and synchronous fluorescence spectroscopy using different . Calibration curves of BSA were obtained. HSA samples were subjected to the same treatment described for standards of BSA. The acquisition of absorption spectra, fluorescence and synchronous fluorescence was performed using a fluorescence spectrophotometer PTI/QM-40. This method showed excellent accuracy, with a correlation coefficient of 0.988. The deviations that were obtained are below 5%, they were evaluated by dilution involving the working range of the calibration standard curve. The detection limit was 5,076x10-9 [mol/L] and the limit of quantification of 1,692x10-8 [mol/L]. HSA was quantified in serum samples of seven healthy patients, randomly selected in the city of Bucaramanga. According to the results, we can say that it is possible to quantify the serum albumin content in different media, using fluorescence spectroscopy and synchronous fluorescence, whereby interference is eliminated, insensitivity to turbidity, background noise levels low sample, which is not necessary to use markers and additional treatments to the sample after its dissolution.application/pdfspaUniversidad Industrial de SantanderFacultad de CienciasQuímicaEscuela de QuímicaEspectroscopia De FluorescenciaFluorescencia SincrónicaAlbumina SéricaFluorescence SpectroscopyFluorescence SynchronousSerum Albumin.Implementación de un método de análisis para la determinación de albúmina sérica humana y bovina por espectroscopia de fluorescenciaImplementation of a method for the determination of human and bovine serum albumin by fluorescence spectroscopyTesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_b1a7d7d4d402bcceORIGINALCarta de autorización.pdfapplication/pdf77959https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/a3b515e8-da06-4473-8e34-6ee283923bfd/downloada66999830176aabea3f23b9d8d2c658dMD51Documento.pdfapplication/pdf1852900https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/916923ad-7af6-46e6-8175-2264d5cef4fe/download6ea52d63ece0c473fd6fc0d2fbd3e9faMD52Nota de proyecto.pdfapplication/pdf569938https://noesis.uis.edu.co/bitstreams/0eaf1467-ca68-4567-a97b-5f9f871b2b9c/download7e107093c12aac9269408c7854df8bebMD5320.500.14071/25591oai:noesis.uis.edu.co:20.500.14071/255912024-03-03 13:43:15.358http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/open.accesshttps://noesis.uis.edu.coDSpace at UISnoesis@uis.edu.co |