Estandarización de un método por HPLC para cuantificar diclofenaco en muestras de microdiálisis mediante fotoderivatización precolumna

RESUMEN: Introducción: la cuantificación del diclofenaco en muestras de pequeño volumen y baja concentración de analito es compleja y requiere de un método analítico sencillo, altamente sensible y reproducible. Objetivo: estandarizar un método por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) con fotoderivatización precolumna, para cuantificar diclofenaco en muestras de pequeño volumen y baja concentración de analito. Métodos: se obtuvieron los fotoproductos del diclofenaco mediante irradiación de muestras a = 254 nm en celdas de cuarzo, politetrafluoroetileno (PTFE) y polivinilcloruro (PVC), colocadas en diferentes posiciones del área de irradiación durante 6, 24 y 60 min respectivamente. Para la separación de los fotoproductos se utilizó una columna C-18 Agilent Eclipse Plus (5 µm; 150 mm; 4,6 µm id.), usando como fase móvil acetonitrilo (ACN): agua, acidulada con ácido fosfórico hasta pH= 3,0 en diferentes proporciones hasta encontrar la óptima; la temperatura empleada fue de 30 °C, el flujo de 1 mL/min y el volumen de inyección de 20 µL. Se detectaron los fotoproductos por fluorescencia a lambas de excitación y emisión de 286 y 360 nm respectivamente. Resultados: la fotodegradación del diclofenaco en celdas de PTFE ocurrió en 6 min cuando se irradiaron soluciones a 254 nm en el centro del área de irradiación. La de los tres fotoproductos principales se logró utilizando una fase móvil ACN: agua, acidulada con ácido fosfórico hasta pH= 3,0; 65:35. El fotoproducto que eluye a 3,4 min se produjo en concentraciones altas y estables las cuales presentaron una tendencia lineal en un gráfico de respuesta del equipo (área) vs. concentración de diclofenaco en un rango entre 1,25-500 ng/mL. Conclusiones: se logró estandarizar un método por HPLC para la cuantificación de diclofenaco presente en muestras de pequeño volumen y baja concentración, el cual podrá someterse a proceso de validación.

• Autores: Correa Cano, Omar de Jesús; Ruiz Correa, Adriana María; Restrepo Garay, Margarita María
• Tipo de recurso: Article of investigation
• Fecha de publicación: 2014
• Institución: Universidad de Antioquia
• Repositorio: Repositorio UdeA
• Idioma: spa
• OAI Identifier: oai:bibliotecadigital.udea.edu.co:10495/42232
• Acceso en línea: https://hdl.handle.net/10495/42232
• Palabra clave: Politetrafluoroetileno; Polytetrafluoroethylene; Diclofenaco; Diclofenac; Fluorescencia; Fluorescence; Cromatografía Líquida de Alta Presión; Chromatography, High Pressure Liquid; Microdiálisis; Microdialysis; https://id.nlm.nih.gov/mesh/D011138; https://id.nlm.nih.gov/mesh/D004008; https://id.nlm.nih.gov/mesh/D005453; https://id.nlm.nih.gov/mesh/D002851; https://id.nlm.nih.gov/mesh/D017551
• Rights: openAccess
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