Evaluación de la supervivencia y replicación intracelular de cepas mutantes de Histoplasma capsulatum para el gen ZRT2 relacionado con la obtención de zinc

Introducción: Histoplasma capsulatum es un hongo intracelular facultativo capaz de sobrevivir al interior de los macrófagos, donde este fagocito restringe la disponibilidad de zinc como un mecanismo de defensa, conocido como “inmunidad nutricional”; para contrarrestar este mecanismo, el hongo activa mecanismos de obtención de metales como el transportador ZRT2, potencialmente clave para su persistencia intracelular. Objetivo: Evaluar la supervivencia y replicación intracelular de cepas mutantes de H. capsulatum para el gen ZRT2, implicado en la obtención de zinc, utilizando un modelo in vitro con macrófagos activados por citoquinas. Materiales y métodos: Se generaron cepas mutantes (PTS1222) mediante edición génica por el sistema CRISPR/Cas9 y se compararon con cepas silvestres (WT). Se analizó la expresión de ZRT2 mediante qPCR en condiciones basales, con la adición de zinc exógeno, ZnSO₄ (5 µM y 10 µM), y un quelante de zinc, TPEN (ácido N,N,N′,N′-tetrakis(2-piridilmetil)-1,2-ethanediamine). La supervivencia intracelular se evaluó tras infectar macrófagos activados con IFN-γ (50 ng/ml), a través del conteo de unidades formadoras de colonia (UFC) a las 24 y 48 horas. Resultados: La cepa PTS1222 mostró una reducción significativa (~50 %) en la expresión de ZRT2 y una respuesta atenuada a TPEN y suplementación de zinc (P < 0.05). Además, presentaron menor supervivencia intracelular frente a la cepa WT en los tiempos evaluados (P < 0.001). Conclusiones: Este estudio aporta evidencia del papel del gen ZRT2 en la fisiopatología de H. capsulatum y su adaptación a condiciones de inmunidad. Los hallazgos resaltan el valor de integrar herramientas genéticas, inmunológicas y moleculares para comprender los mecanismos que sustentan su capacidad infectiva.

• Autores: Villegas Correa, Samantha; Monsalve, Ana Gabriela
• Tipo de recurso: Article of investigation
• Fecha de publicación: 2025
• Institución: Universidad de Antioquia
• Repositorio: Repositorio UdeA
• Idioma: spa
• OAI Identifier: oai:bibliotecadigital.udea.edu.co:10495/47128
• Acceso en línea: https://hdl.handle.net/10495/47128
• Palabra clave: Histoplasma; Zinc; Macrófagos; Histoplasma; Zinc; Macrophages; Histoplasma capsulatum; ZRT2; CRISPR/Cas9; https://id.nlm.nih.gov/mesh/D006658; https://id.nlm.nih.gov/mesh/D015032; https://id.nlm.nih.gov/mesh/D008264; ODS 3: Salud y bienestar. Garantizar una vida sana y promover el bienestar de todos a todas las edades
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