Primer aislamiento de Encephalitozoon intestinalis a partir de muestra de materia fecal de un paciente colombiano con sida

RESUMEN: Introducción. Los microsporidios son agentes de infecciones oportunistas en pacientes con sida y con trasplantes, principalmente. Enterocytozoon bieneusi y Encephalitozoon intestinalis son los más frecuentes, asociados con infecciones entéricas. Los cultivos celulares han contribuido al con...

Full description

Autores:
Bedoya Urrego, Katherine
Montoya Palacio, Montoya Palacio
Galván Díaz, Ana Luz
Botero Garcés, Jorge Humberto
Tipo de recurso:
Article of investigation
Fecha de publicación:
2008
Institución:
Universidad de Antioquia
Repositorio:
Repositorio UdeA
Idioma:
spa
OAI Identifier:
oai:bibliotecadigital.udea.edu.co:10495/35099
Acceso en línea:
https://hdl.handle.net/10495/35099
Palabra clave:
Encephalitozoon
Encephalitozoon
Microsporidiosis
Microsporidiosis
Acquired Immunodeficiency Syndrome
Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida
Patient Isolation
Aislamiento de Pacientes
Cells, Cultured
Células Cultivadas
Feces
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openAccess
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description RESUMEN: Introducción. Los microsporidios son agentes de infecciones oportunistas en pacientes con sida y con trasplantes, principalmente. Enterocytozoon bieneusi y Encephalitozoon intestinalis son los más frecuentes, asociados con infecciones entéricas. Los cultivos celulares han contribuido al conocimiento de los microsporidios. En Colombia no se han obtenido aislamientos provenientes de pacientes con microsporidiosis y, por consiguiente, no existen cepas autóctonas de los mismos. Objetivo. Establecer el cultivo celular de microsporidios intestinales a partir de materia fecal de pacientes parasitados. Materiales y métodos. Se realizó concentración agua-éter de la materia fecal positiva para microsporidios y el sedimento resultante se trató con una mezcla de antibióticos y antimicóticos durante 18 horas a 37 oC. Se inocularon células Vero previamente cultivadas en placas de 24 pozos y en medio RPMI con suplemento de suero bovino fetal al 10% y antibióticos, con las esporas concentradas. Los cultivos se mantuvieron a 37 oC al 5% de CO2. Se cambió de medio cada dos días y se evaluó la presencia de esporas en los sobrenadantes mediante Gramcromótropo rápido en caliente. Resultados. En la segunda semana después de la infección, se encontraron esporas de microsporidios con morfología y coloración características. Mediante PCR se determinó que el microsporidio encontrado correspondía a la especie E. intestinalis. Conclusión. Se estableció el cultivo in vitro de microsporidios de materia fecal. Este protocolo es importante para la obtención y el mantenimiento de cepas autóctonas en Colombia, y contribuirá a las investigaciones de aspectos bioquímicos, inmunológicos y epidemiológicos de dichas cepas.
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En Colombia no se han obtenido aislamientos provenientes de pacientes con microsporidiosis y, por consiguiente, no existen cepas autóctonas de los mismos. Objetivo. Establecer el cultivo celular de microsporidios intestinales a partir de materia fecal de pacientes parasitados. Materiales y métodos. Se realizó concentración agua-éter de la materia fecal positiva para microsporidios y el sedimento resultante se trató con una mezcla de antibióticos y antimicóticos durante 18 horas a 37 oC. Se inocularon células Vero previamente cultivadas en placas de 24 pozos y en medio RPMI con suplemento de suero bovino fetal al 10% y antibióticos, con las esporas concentradas. Los cultivos se mantuvieron a 37 oC al 5% de CO2. Se cambió de medio cada dos días y se evaluó la presencia de esporas en los sobrenadantes mediante Gramcromótropo rápido en caliente. Resultados. En la segunda semana después de la infección, se encontraron esporas de microsporidios con morfología y coloración características. Mediante PCR se determinó que el microsporidio encontrado correspondía a la especie E. intestinalis. Conclusión. Se estableció el cultivo in vitro de microsporidios de materia fecal. Este protocolo es importante para la obtención y el mantenimiento de cepas autóctonas en Colombia, y contribuirá a las investigaciones de aspectos bioquímicos, inmunológicos y epidemiológicos de dichas cepas.ABSTRACT: Introduction. Microsporidia are obligate intracellular parasites that are recognized as important opportunistic pathogens of immunocompromised and transplanted patients. Enterocytozoon bieneusi and, less frequently, Encephalitozoon intestinalis are the most prevalent species in humans; both of them are associated with enteric infections. Cell cultures have been useful in the study of microsporidia biology. In Colombia, however, no isolates of microsporidia from patients with AIDS have been obtained. Objective. A cell culture of intestinal microsporidia was established from stools of positive patients in order to isolate a native strain. Materials and methods. Stool from a single AIDS patient was concentrated with the waterether technique, and the sediment was treated with a mixture of antibiotics and antifungal agents for 18 hours at 37o C. Vero cells were cultivated in 24-well plates with Gibco® RPMI medium supplemented with 10% bovine fetal serum and antibiotics. The culture was subsequently inoculated with previously concentrated spores. The medium was changed every second day and the presence of spores was evaluated with the Quick Hot Gram chromotrope stain. Results. Two weeks post-infection, microsporidial spores were identified with characteristic morphology and staining properties. PCR results showed that Encephalitozoon intestinalis was the isolated species. Conclusions. A cell culture of microsporidia was established from a stool sample. This protocol is important to isolate and maintain additional native Colombian strains and it will contribute to biochemical, immunological and epidemiological studies of the currently established strain.COL00075067application/pdfspaInstituto Nacional de SaludBogotá, Colombiasin facultad - programahttps://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/co/info:eu-repo/semantics/openAccesshttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2Primer aislamiento de Encephalitozoon intestinalis a partir de muestra de materia fecal de un paciente colombiano con sidaFirst Isolate of Encephalitozoon Intestinalis from Stools of a Colombian Patient with AIDSArtículo de investigaciónhttp://purl.org/coar/resource_type/c_2df8fbb1https://purl.org/redcol/resource_type/ARThttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85info:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionEncephalitozoonEncephalitozoonMicrosporidiosisMicrosporidiosisAcquired Immunodeficiency SyndromeSíndrome de Inmunodeficiencia AdquiridaPatient IsolationAislamiento de PacientesCells, CulturedCélulas CultivadasFecesHecesBiomédica447344128BiomédicaPublicationORIGINALBedoyaKatherine_FirstIsolateEncephalitozoon_2008.pdfBedoyaKatherine_FirstIsolateEncephalitozoon_2008.pdfArtículo de Investigaciónapplication/pdf135992https://bibliotecadigital.udea.edu.co/bitstreams/7454a4cb-bbd5-43fe-b35c-cfeb5e8ae132/download2c3bf5ce628b94208f2f75961ae399feMD51trueAnonymousREADCC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; 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