Estandarización de técnica para el aislamiento y purificación de bacteriófagos para la inhibición de crecimiento de escherichia coli a partir de aguas residuales
El problema actual de la resistencia a los antibióticos ha provocado que las autoridades sanitarias hagan una llamada a la comunidad científica I+D (investigación y desarrollo), para responder a una de las amenazas más preocupantes para la salud pública mundial. La aparición y propagación de patógen...
- Autores:
-
Blanquicet González, Darien Daniel
Fonseca Tapias, Liz Dany
- Tipo de recurso:
- Trabajo de grado de pregrado
- Fecha de publicación:
- 2022
- Institución:
- Universidad Libre
- Repositorio:
- RIU - Repositorio Institucional UniLibre
- Idioma:
- OAI Identifier:
- oai:repository.unilibre.edu.co:10901/31354
- Acceso en línea:
- https://hdl.handle.net/10901/31354
- Palabra clave:
- Bacteriófago
Agua residual
Antibióticos
Escherichia coli
Resistencia bacteriana
Espectrofotometría
Fagoterapia
Bacteriophage
Wastewater
Antibiotics
Escherichia coli
Bacterial resistance
Spectrophotometry
Phage therapy
Farmacorresistencia microbiana
Bacteriófagos
Escherichia coli
- Rights
- restrictedAccess
- License
- http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/co/
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Farmacorresistencia microbiana Bacteriófagos Escherichia coli |
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El problema actual de la resistencia a los antibióticos ha provocado que las autoridades sanitarias hagan una llamada a la comunidad científica I+D (investigación y desarrollo), para responder a una de las amenazas más preocupantes para la salud pública mundial. La aparición y propagación de patógenos farmacorresistentes que han adquirido nuevos mecanismos de resistencia, provocan infecciones que no pueden tratarse con antimicrobianos que ofrece la industria farmacéutica, como los antibióticos. Ante esto, se ha retomado el interés por estudiar alternativas para el tratamiento de infecciones causadas por bacterias patógenas, una de éstas es la utilización de bacteriófagos. El objetivo de este estudio es el aislamiento y purificación de bacteriófagos para la inhibición de crecimiento de Escherichia coli a partir de aguas residuales y determinar la presencia de DNA bacteriófago a través de espectrofotometría y fluorimetría. Este proyecto se puede delimitar al tipo de estudio intervención experimental fase II, en el cual se verificó el efecto del bacteriófago ante una especie bacteriana seleccionada; empleando el método doble capa de agar, aislando y utilizando una cepa de Escherichia coli de las muestras de agua del Lago del Cisne, para la recuperación de bacteriófagos se utilizaron filtros de membrana de 0,22 µm y se trató el DNA bacteriófago con y sin cloroformo. Para la obtención de resultados se realizaron numerosos ensayos u experimentos para lograr un correcto aislamiento de bacteriófagos de las aguas residuales: en el momento de cuantificar los bacteriófagos no existen diferencias significativas entre las diluciones, entre los resultados se observaron UFP de forma circular claras definiéndose como fagos líticos, al causar lisis en la célula bacteriana. A través de la metodología planteada fue posible aislar bacterias y fagos que inhibieron el crecimiento de Escherichia coli que se obtuvo de las muestras de aguas recolectadas. No se vio reflejada una diferencia en los resultados al utilizar un tratamiento como el cloroformo para purificar y medir la concentración de DNA de los bacteriófagos en los equipos de NanoDrop y Fluorometer. |
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Villarreal Camacho, José LuisBlanquicet González, Darien DanielFonseca Tapias, Liz DanyBarranquilla2025-06-17T15:36:52Z2025-06-17T15:36:52Z2022https://hdl.handle.net/10901/31354El problema actual de la resistencia a los antibióticos ha provocado que las autoridades sanitarias hagan una llamada a la comunidad científica I+D (investigación y desarrollo), para responder a una de las amenazas más preocupantes para la salud pública mundial. La aparición y propagación de patógenos farmacorresistentes que han adquirido nuevos mecanismos de resistencia, provocan infecciones que no pueden tratarse con antimicrobianos que ofrece la industria farmacéutica, como los antibióticos. Ante esto, se ha retomado el interés por estudiar alternativas para el tratamiento de infecciones causadas por bacterias patógenas, una de éstas es la utilización de bacteriófagos. El objetivo de este estudio es el aislamiento y purificación de bacteriófagos para la inhibición de crecimiento de Escherichia coli a partir de aguas residuales y determinar la presencia de DNA bacteriófago a través de espectrofotometría y fluorimetría. Este proyecto se puede delimitar al tipo de estudio intervención experimental fase II, en el cual se verificó el efecto del bacteriófago ante una especie bacteriana seleccionada; empleando el método doble capa de agar, aislando y utilizando una cepa de Escherichia coli de las muestras de agua del Lago del Cisne, para la recuperación de bacteriófagos se utilizaron filtros de membrana de 0,22 µm y se trató el DNA bacteriófago con y sin cloroformo. Para la obtención de resultados se realizaron numerosos ensayos u experimentos para lograr un correcto aislamiento de bacteriófagos de las aguas residuales: en el momento de cuantificar los bacteriófagos no existen diferencias significativas entre las diluciones, entre los resultados se observaron UFP de forma circular claras definiéndose como fagos líticos, al causar lisis en la célula bacteriana. A través de la metodología planteada fue posible aislar bacterias y fagos que inhibieron el crecimiento de Escherichia coli que se obtuvo de las muestras de aguas recolectadas. No se vio reflejada una diferencia en los resultados al utilizar un tratamiento como el cloroformo para purificar y medir la concentración de DNA de los bacteriófagos en los equipos de NanoDrop y Fluorometer.Universidad Libre Seccional Barranquilla -- Facultad de Ciencias Exactas y Naturales -- Programa de MicrobiologíaThe current problem of antibiotic resistance has prompted health authorities to call on the scientific community R&D (research and development) to respond to one of the most worrying threats to global public health. The emergence and spread of drug-resistant pathogens that have acquired new resistance mechanisms cause infections that cannot be treated with antimicrobials offered by the pharmaceutical industry, such as antibiotics. In view of this, there is renewed interest in studying alternatives for the treatment of infections caused by pathogenic bacteria, one of which is the use of bacteriophages. The objective of this study is the isolation and purification of bacteriophages for the inhibition of Escherichia coli growth from wastewater and to determine the presence of bacteriophage DNA through spectrophotometry and fluorimetry. This project can be delimited to the type of experimental intervention study phase II, in which the effect of the bacteriophage was verified against a selected bacterial species; using the double agar layer method, isolating and using a strain of Escherichia coli from the water samples of the Lago del Cisne, for the recovery of bacteriophages, membrane filters of 0.22 µm were used and the bacteriophage DNA was treated with and without chloroform. To obtain the results, numerous tests and experiments were carried out to achieve a correct isolation of bacteriophages from wastewater: at the time of quantifying the bacteriophages, there were no significant differences between dilutions; among the results, clear circular UFP were observed, which were defined as lytic phages, since they caused lysis in the bacterial cell. Through the proposed methodology it was possible to isolate bacteria and phages that inhibited the growth of Escherichia coli obtained from the water samples collected. There was no difference in the results when using a treatment such as chloroform to purify and measure the DNA concentration of the bacteriophages in the NanoDrop and Fluorometer equipment.PDFhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/co/Atribución-NoComercial-SinDerivadas 2.5 Colombiainfo:eu-repo/semantics/restrictedAccesshttp://purl.org/coar/access_right/c_16ecBacteriófagoAgua residualAntibióticosEscherichia coliResistencia bacterianaEspectrofotometríaFagoterapiaBacteriophageWastewaterAntibioticsEscherichia coliBacterial resistanceSpectrophotometryPhage therapyFarmacorresistencia microbianaBacteriófagosEscherichia coliEstandarización de técnica para el aislamiento y purificación de bacteriófagos para la inhibición de crecimiento de escherichia coli a partir de aguas residualesTesis de Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1finfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisÁCS, Norbert, GAMBINO, Michela, BRONDSTED, Lone. 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