Evaluación de sustitutos del suero fetal bovino para estabilizar la acción de la tripsina en un protocolo de bandeo g convencional
El presente trabajo de investigación tiene como objetivo principal evaluar la eficacia de diferentes posibles sustitutos del suero fetal bovino (SFB) para estabilizar la acción de la tripsina en un protocolo de bandeo G convencional. El SFB se usa ampliamente en este protocolo para inhibir la tripsi...
- Autores:
-
Murcia Torres, Jesús David
- Tipo de recurso:
- Tesis
- Fecha de publicación:
- 2024
- Institución:
- Universidad Francisco de Paula Santander
- Repositorio:
- Repositorio Digital UFPS
- Idioma:
- spa
- OAI Identifier:
- oai:repositorio.ufps.edu.co:ufps/10382
- Acceso en línea:
- https://repositorio.ufps.edu.co/handle/ufps/10382
- Palabra clave:
- Suero fetal bovino
Enzimas
Inhibidor
Tripsina
Suero fetal bovino
Enzima
Inhibidor
Bandeo G.
- Rights
- openAccess
- License
- Atribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)
| id |
RUFPS2_cecdb69fd6d8bed688297631dce4a3b5 |
|---|---|
| oai_identifier_str |
oai:repositorio.ufps.edu.co:ufps/10382 |
| network_acronym_str |
RUFPS2 |
| network_name_str |
Repositorio Digital UFPS |
| repository_id_str |
|
| dc.title.spa.fl_str_mv |
Evaluación de sustitutos del suero fetal bovino para estabilizar la acción de la tripsina en un protocolo de bandeo g convencional |
| title |
Evaluación de sustitutos del suero fetal bovino para estabilizar la acción de la tripsina en un protocolo de bandeo g convencional |
| spellingShingle |
Evaluación de sustitutos del suero fetal bovino para estabilizar la acción de la tripsina en un protocolo de bandeo g convencional Suero fetal bovino Enzimas Inhibidor Tripsina Suero fetal bovino Enzima Inhibidor Bandeo G. |
| title_short |
Evaluación de sustitutos del suero fetal bovino para estabilizar la acción de la tripsina en un protocolo de bandeo g convencional |
| title_full |
Evaluación de sustitutos del suero fetal bovino para estabilizar la acción de la tripsina en un protocolo de bandeo g convencional |
| title_fullStr |
Evaluación de sustitutos del suero fetal bovino para estabilizar la acción de la tripsina en un protocolo de bandeo g convencional |
| title_full_unstemmed |
Evaluación de sustitutos del suero fetal bovino para estabilizar la acción de la tripsina en un protocolo de bandeo g convencional |
| title_sort |
Evaluación de sustitutos del suero fetal bovino para estabilizar la acción de la tripsina en un protocolo de bandeo g convencional |
| dc.creator.fl_str_mv |
Murcia Torres, Jesús David |
| dc.contributor.advisor.none.fl_str_mv |
Ossa Reyes, Humberto |
| dc.contributor.author.none.fl_str_mv |
Murcia Torres, Jesús David |
| dc.contributor.corporatename.none.fl_str_mv |
Universidad Francisco de Paula Santander |
| dc.contributor.jury.none.fl_str_mv |
Suárez Contreras, Liliana Yaneth Lopez Barrera, German Luciano Arguello Navarro, Adriana Zulay |
| dc.subject.lemb.none.fl_str_mv |
Suero fetal bovino Enzimas Inhibidor |
| topic |
Suero fetal bovino Enzimas Inhibidor Tripsina Suero fetal bovino Enzima Inhibidor Bandeo G. |
| dc.subject.proposal.spa.fl_str_mv |
Tripsina Suero fetal bovino Enzima Inhibidor Bandeo G. |
| description |
El presente trabajo de investigación tiene como objetivo principal evaluar la eficacia de diferentes posibles sustitutos del suero fetal bovino (SFB) para estabilizar la acción de la tripsina en un protocolo de bandeo G convencional. El SFB se usa ampliamente en este protocolo para inhibir la tripsina de forma competitiva y lograr un bandeo cromosómico estable y de alta calidad. Sin embargo, el SFB tiene varias limitaciones como su alto costo, limitada disponibilidad y cuestionamientos éticos relacionados con su obtención. Se exploraron mediante ensayos experimentales varios sustitutos potenciales como leche pasteurizada de vaca, leche en polvo preparada, bebida de Soja, Fitohemaglutinina y variaciones en pH y temperatura. Se evaluó su capacidad para inhibir la tripsina comparándola con las bandas obtenidas usando SFB como punto de referencia. Los resultados muestran que la leche pasteurizada y en polvo logran inhibir la tripsina de forma comparable al SFB, obteniendo bandas estables y de alta calidad similares. En contraste, las variaciones de pH y temperatura, así como los extractos vegetales comerciales no lograron una inhibición efectiva. Este trabajo permite concluir que la leche puede ser un sustituto viable del SFB en protocolos de bandeo G, aportando una alternativa más económica y ética. |
| publishDate |
2024 |
| dc.date.issued.none.fl_str_mv |
2024 |
| dc.date.accessioned.none.fl_str_mv |
2025-10-20T16:07:18Z |
| dc.type.none.fl_str_mv |
Trabajo de grado - Pregrado |
| dc.type.coar.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f |
| dc.type.coar.none.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/resource_type/c_46ec |
| dc.type.coarversion.none.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85 |
| dc.type.content.none.fl_str_mv |
Text |
| dc.type.driver.none.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/bachelorThesis |
| dc.type.redcol.none.fl_str_mv |
http://purl.org/redcol/resource_type/TP |
| dc.type.version.none.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
| format |
http://purl.org/coar/resource_type/c_46ec |
| status_str |
publishedVersion |
| dc.identifier.uri.none.fl_str_mv |
https://repositorio.ufps.edu.co/handle/ufps/10382 |
| dc.identifier.local.none.fl_str_mv |
TIB V00102/2024 |
| url |
https://repositorio.ufps.edu.co/handle/ufps/10382 |
| identifier_str_mv |
TIB V00102/2024 |
| dc.language.iso.none.fl_str_mv |
spa |
| language |
spa |
| dc.relation.references.none.fl_str_mv |
Adayabalam, B., & Prakash, H. (2018). Historia y evolución de las técnicas citogenéticas: Aplicaciones actuales y futuras en investigación básica y clínica. Mutation Research/Genetic Toxicology and Environmental Mutagenesis, vol.836 Part. A, 03-12. Obtenido de https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S1383571818302237 Afiler, M. (2017). Cariotificación en recién nacidos con anomalías congénitas atendidos en el hospital Victor Lazarte Echegaray de Trujillo, de abril a septiembre del 2015. Tesis doctoral, Universidad Nacional de Trujillo. Obtenido de http://dspace.unitru.edu.pe/bitstream/handle/UNITRU/7767/Tesis%20DoctoradoX%20- %20Mirtha%20Yanina%20Afiler%20Horna.pdf?sequence=1&isAllowed=y Aldabe, J., Hueto, A., Juni, J., & López, P. (1998). Las enzimas. En Biología (pág. 128). Erein. Barrero, J., Cruz, C., Casallas, J., & Vasquez, J. (2020). Evaluación in silico de péptidos bioactivos derivados de la digestión de proteínas presentes en la leche de bovino (B. taurus), oveja (O. aries), cabra (C. hircus) y búfalo (B. bubalis). TecnoLógicas vol.24 no.50. Obtenido de https://www.redalyc.org/journal/3442/344264813025/html/ Becerra, J., & López, J. (2019). Citogenética del cáncer; alteraciones cromosómicas útiles para diagnóstico oportuno y pronóstico en neoplasias linfoproliferativas. Revista de la Facultad de Ciencias Universidad Nacional de Colombia vol.9 no.1. Obtenido de https://revistas.unal.edu.co/index.php/rfc/article/view/74595/73885 Benasayag, S., & Gallino, M. (2010). Bases citogenéticas para la práctica hematológica De lo supuesto a lo expuesto en nomenclatura citogenética. HEMATOLOGIA vol.14 no.2, 58- 68. Obtenido de http://www.sah.org.ar/docs/sah2-4.pdf Brunser, O. (2018). Avances en el conocimiento de las proteínas de la leche materna. Rev. chilena de pediatria vol.89 no.2, 261-269. Obtenido de https://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0370-41062018000200261 Bueno, M. (2011). Cromosomas, vehiculos en la organización y transmisión de los caracteres. Acta biológica Colombiana vol.16 no.3, 43-60. Obtenido de http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0120-548X2011000300003 Calasanz, M. (2009). Revisión de técnicas de citogenética convencional y molecular y su implicación en el diagnóstico y pronóstico del cáncer. Anales Del Sistema Sanitario De Navarra vol.24, 17-29. Obtenido de https://recyt.fecyt.es/index.php/ASSN/article/view/5833 Calderon de la Barca, A. M., Wall, A., Jara, M., Gonzalez, A., & Ruiz, A. (2000). Modificación enzimática de las propiedades funcionales, nutricias y sensoriales de la soya para alimentación especial. Archivos Latinoamercanos de Nutrición vol.50 n.1, 26-32. Obtenido de https://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0004- 06222000000100003 cientifica SENNA. (s.f.). Tripsina. Obtenido de https://www.cientificasenna.com/producto/tripsina/#:~:text=A%20trav%C3%A9s%20de %20la%20tripsinizaci%C3%B3n,temperatura%20de%2037%C2%B0C Clementea, A., & Domoney, C. (2006). Biological significance of polymorphism in legume protease inhibitors from the Bowman-Birk family. Current protein & peptide science, 201-216. Obtenido de https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16787260/ Cox, M., & Nelson, D. (2008). Lehninger Principles of Biochemistry. OMEGA. Delgado, M. D. (2009). Modificaciones de la cromatina, regulación génica y cáncer. Monografías de la Real Academia Nacional de Farmacia, 139-275. Obtenido de https://core.ac.uk/reader/230316712 Dominguez, U. (2015). Sitio Argentino de Producción Animal. Obtenido de Antimicrobianos en el calostro bovino: https://www.produccionanimal.com.ar/produccion_bovina_de_leche/cria_artificial/72- Antimicrobianos_en_calostro.pdf Doucet, C., Ernou, I., Zhang, Y., Jean-Roch, L., Begot, L., & Santo, J. (2005). Platelet lysates promote mesenchymal stem cell expansion: a safety substitute for animal serum in cellbased therapy applications. Journal of cellular physiology, vol.205 no.2, 228-236 Drets, M. (2002). Una saga citogenética: El descubrimiento de los métodos de bandeo cromosómico. Significado y proyección bio-médica. Rev. Méd. Urug. vol.18 no.2, 107- 121. Obtenido de http://www.scielo.edu.uy/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1688- 03902002000200003 Esparza, E., Cardenas, A., Huicochea, J. C., & Araujo, M. (2017). Cromosomas, cromosomopatías y su diagnóstico. Rev. Mexicana de Pediatría vol.84 no.1, 30-39. Obtenido de https://www.medigraphic.com/pdfs/pediat/sp-2017/sp171g.pdf EUGENOMIC. (2020). Obtenido de Inhibidor enzimático: https://eugenomic.com/recursos/glosario/inhibidor/ Frómeta, A., Sánchez, S., Maya, M., Jara, J., & Valarezo, D. (2017). El método Clínico: Perspectivas actuales. Bionatura vol.2 no.1, 255-260. Obtenido de https://www.revistabionatura.com/2017.02.01.8.html Galeano, L., Benavides, A., & Bejarano, D. (2019). Optimización del cultivo de linfocitos para obtención de cromosomas y analisis de fragilidad: Importancia en X fragil y deficit cognitivo. Obtenido de Repositorio UNICOLMAYOR: https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/handle/unicolmayor/3706/INFORME%2 0FINAL-3-77.pdf?sequence=3 Garcia, C. (2014). Inhibidores de proteasas en leguminosas. Tesis titulación, Universidad de Valladolid. Obtenido de https://uvadoc.uva.es/bitstream/handle/10324/7486/TFG-MN170.pdf?sequence=1&isAllowed=y García, J. d. (2019). Desde la Genética Médica hacia la Medicina Genómica. Rev. de investigación y educación en ciencias de la salud vol.4 no.1, 20-32. Obtenido de https://riecs.es/index.php/riecs/article/view/137 Garcia, L., & Gallardo, L. (2007). Evaluación de la absorción y metabolismo intestinal. Nutr. Hosp. vol.22 suppl.2, 05-13. Obtenido de https://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0212- 16112007000500002&lng=en Genética, S. U. (2022). Guia de procedimiento: Cariotipo - Banda GTG en médula ósea. Perú. Gersen, S., & Keagle, M. (2005). The Principles of Clinical Cytogenetics (Second Edition ed.). Humana Press. Gomez, F., & Hernandez, B. (2015). Biología molecular y citogenética. Barcelona: Altamar González, S., & Lavaut, K. (2022). Técnicas de citogenética para el estudio de las leucemias. Rev Cubana Hematol Inmunol Hemoter vol.38 no.2, Epub 01. Obtenido de http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-02892022000200002 Hernandez, J. (2003). Aislamiento, clonación y secuenciación de secuencias que codifican para inhibidores KAZAL en el camarón blanco. Tesis maestria, Centro de investigaciones biológicas del Noroeste. Obtenido de https://cibnor.repositorioinstitucional.mx/jspui/bitstream/1001/497/1/hernandez_j.pdf Huang, H.-L., Hsing, H.-W., & Chen, Y.-W. (2010). Trypsin-induced proteome alteration during cell subculture in mammalian cells. Journal of Biomedical Science 17, 36. Obtenido de https://jbiomedsci.biomedcentral.com/articles/10.1186/1423-0127-17-36#citeas Jochems, C. E., Van Der Valk, J. B., Stafleu, F. R., & Baumans, V. (2002). The use of fetal bovine serum: ethical or scientific problem? Alternatives to laboratory animals : ATLA, vol,30 no.2, 219-227. Obtenido de https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11971757/ Keil, B. (1992). Specificity of Proteolysis. Springer Berlin. Obtenido de https://link.springer.com/book/10.1007/978-3-642-48380-6 Khan Academy. (s.f.). Cromosomas. Obtenido de https://es.khanacademy.org/science/biology/cellular-molecular-biology/intro-to-celldivision/a/dna-and-chromosomes-article Khan Academy. (s.f.). Regulación enzimática. Obtenido de https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/cellular-energetics/environmentalimpacts-on-enzyme-function/a/enzyme-regulation Laboratorium Discounter. (s.f). Tripsina. Obtenido de https://www.laboratoriumdiscounter.nl/es/quimicos/a-z/t/tripsina/ Larripa, I. (2011). Citogenética humana: del microscopio al microchip. HEMATOLOGIA, vol.15 no.2, 27-34. Obtenido de https://sah.org.ar/revistasah/numeros/vol15.n2.27-34.pdf Marchbank, T., Weaver, G., Nilsen-Hamilton, M., & Playford, R. (2009). Pancreatic secretory trypsin inhibitor is a major motogenic and protective factor in human breast milk. American journal of physiology. Gastrointestinal and liver physiology, 697-703. Obtenido de https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19147803/ mayimex, S.A. (s.f.). Suero fetal bovino. Obtenido de https://mayimex.com/suero-fetal-bovinio/ MERCK. (s.f.). FBS, suero bovino fetal. Obtenido de https://www.sigmaaldrich.com/CO/es/products/cell-culture-and-analysis/cell-culturesupplements-and-reagents/fbs MERCK. (s.f.). Tripsina from porcine pancreas. Obtenido de https://www.sigmaaldrich.com/CO/es/product/sigma/93614 Morillo, A. E. (2020). Estandarización de los protocolos para determinar las características cariotípicas y daño al ADN en células de cáncer de tiroides mediante cariotipaje y ensayo cometa. Tesis titulación, Universidad de las Fuerzas Armadas ESPE. Obtenido de http://repositorio.espe.edu.ec/bitstream/21000/23152/1/T-ESPE-044091.pdf Müller-Esterl, W. (2008). Bioquímica: Fundamentos para medicina y ciencias de la vida. Reverté. nutriNews. (2022). ¿Qué son los factores antinutricionales de los alimentos? Obtenido de https://nutrinews.com/breve-repaso-por-los-factores-antinutricionales-de-los-alimentos/ Ortega Torres, M., Torres, J., & Osorio, J. (2018). Fundamentos de citogenética humana y animal. Sello Editorial UNAD. Obtenido de https://hemeroteca.unad.edu.co/index.php/book/article/view/4119/4121 Quicazán, M., & Caicedo, L. (2012). Inactivación del inhibidor de tripsina durante el tratamiento térmico de bebidas de soya. Vitae, 337-339. Obtenido de https://www.redalyc.org/pdf/1698/169823914105.pdf QUIMICA.ES . (s.f.). Obtenido de Inhibidor enzimático: https://www.quimica.es/enciclopedia/Inhibidor_enzim%C3%A1tico.html#_note-12/ QuimiNet. (2008). ¿Cómo se produce el suero fetal bovino (SFB)? Obtenido de https://www.quiminet.com/articulos/como-se-produce-el-suero-fetal-bovino-sfb27577.htm Romo Espinosa, B. (2023). Estandarización de cultivos celulares adherentes en cultivos en suspensión mediante el uso de microportadores. Proyecto de investigación. Obtenido de https://repositorio.xoc.uam.mx/jspui/bitstream/123456789/37900/2/250518.pdf Ryan, B., & Henehan, G. (2016). Avoiding Proteolysis During Protein Purification. Protein Chromatography, 53-69. Obtenido de https://link.springer.com/protocol/10.1007/978-1- 4939-6412-3_4 Salamanca Gomez, F. (1990). Citogenetica humana , fundamentos y aplicaciones clinicas , 1990 , 400 p. Médica Panamericana. Schwarz, C., Leicht, U., Rothe, C., Drosse, I., Volker, L., Rocken, M., & Schieker, M. (2012). Effects of different media on proliferation and differentiation capacity of canine, equine and porcine adipose derived stem cells. Research in veterinary science, vol.93 no.1, 457- 462. Obtenido de https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21940026/ Silva, Crane, Bermudez, & Bueno. (1991). Citogenética Humana: Manual de procedimientos. Imprenta del Instituto Nacional de Salud. Simancas Escorcia, V., Vergara Hernandez, C., & Diaz Caballero, A. (2018). Influencia del suero fetal bovino en el cultivo de fibroblastos gingivales. Avances en Odontoestomatología vol.34 no.6, 299-309. Obtenido de https://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0213-12852018000600004 Soriano Torres, M., & Arencibia, R. (2010). Estudio bibliométrico de la citogenética humana en el período 1999-2008. ACIMED vol.21 no.4, 403-412. Obtenido de http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1024-94352010000400004 Standford Medicine Children's Health. (s.f.). Genética. Obtenido de https://www.stanfordchildrens.org/es/topic/default?id=gen-tica-90-P05560 Timberlake, K. (2013). Química general, orgánica y biológica: estructuras de la vida. Mñexico: Pearson Education. Tineo de Rumbos, E. C. (2016). Citogenética de triatominos: una herramienta útil para la enseñanza de la meiosis en el laboratorio de genética. Revista de Investigación vol.40 no.89, 90-104. Obtenido de http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1010- 29142016000300005 Tipathi, S., & Das, K. (1991). Studies on the digestive enzymes of grass carp, Ctenopharyngodon idella (Val.) Vol.92. En Aquaculture (págs. 21-32). Van Der Valk, J. B., Bieback, K., Buta, C., Cochrane, B., Dirks, W. G., & Jienan, F. (2018). Fetal Bovine Serum (FBS): Past - Present - Future. ALTEX, vol.35 no.1, 99-118. Obtenido de https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28800376/ Vargas, J. (2021). Caseina: la proteina de la leche. Obtenido de ipf: https://ipf.com.co/caseinala-proteina-de-la-leche/ Villaverde, N. (2000). La citogenética molecular en el año 2000. Rev. Med Univ Navarra vol.43 no.4,1999, 7-10. Obtenido de https://revistas.unav.edu/index.php/revista-demedicina/article/download/6690/5872 |
| dc.rights.none.fl_str_mv |
Derechos Reservados Universidad Francisco de Paula Santander, 2024 |
| dc.rights.license.none.fl_str_mv |
Atribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0) |
| dc.rights.uri.none.fl_str_mv |
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ |
| dc.rights.accessrights.none.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/openAccess |
| dc.rights.coar.none.fl_str_mv |
http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 |
| rights_invalid_str_mv |
Atribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0) Derechos Reservados Universidad Francisco de Paula Santander, 2024 https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/ http://purl.org/coar/access_right/c_abf2 |
| eu_rights_str_mv |
openAccess |
| dc.format.extent.none.fl_str_mv |
72 páginas. ilustraciones, (Trabajo completo) 1.389 KB |
| dc.format.mimetype.none.fl_str_mv |
application/pdf |
| dc.publisher.none.fl_str_mv |
Universidad Francisco de Paula Santander |
| dc.publisher.faculty.none.fl_str_mv |
Facultad de Ciencias Agrarias y del Ambiente |
| dc.publisher.place.none.fl_str_mv |
San José de Cúcuta |
| dc.publisher.program.none.fl_str_mv |
Ingeniería Ambiental |
| publisher.none.fl_str_mv |
Universidad Francisco de Paula Santander |
| dc.source.none.fl_str_mv |
https://catalogobiblioteca.ufps.edu.co/cgi-bin/koha/opac-retrieve-file.pl?id=70c701c34a60be54d443ee469920852b |
| institution |
Universidad Francisco de Paula Santander |
| bitstream.url.fl_str_mv |
https://repositorio.ufps.edu.co/bitstreams/10ee36ae-c4c6-4684-8ced-52be77b41297/download https://repositorio.ufps.edu.co/bitstreams/da3c26e9-5a1b-4b18-bb33-62d8821acee2/download https://repositorio.ufps.edu.co/bitstreams/ce904052-b262-4213-a4c5-10ae0cfd6b7e/download https://repositorio.ufps.edu.co/bitstreams/639d50c1-7cb1-430b-8f23-6ef013f23665/download |
| bitstream.checksum.fl_str_mv |
86f5057e872e46f7f4b2a1c6a594f5aa b76e7a76e24cf2f94b3ce0ae5ed275d0 a97903fb94b8f7e33c5944e731587e0d b986b3765d220cfd60f9c84d5329548c |
| bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv |
MD5 MD5 MD5 MD5 |
| repository.name.fl_str_mv |
Repositorio Universidad Francisco de Paula Santander |
| repository.mail.fl_str_mv |
bdigital@metabiblioteca.com |
| _version_ |
1851059516665233408 |
| spelling |
Atribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)Derechos Reservados Universidad Francisco de Paula Santander, 2024https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccesshttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2Ossa Reyes, HumbertoMurcia Torres, Jesús DavidUniversidad Francisco de Paula SantanderSuárez Contreras, Liliana YanethLopez Barrera, German Lucianovirtual::20-1Arguello Navarro, Adriana Zulayvirtual::21-12025-10-20T16:07:18Z2024https://repositorio.ufps.edu.co/handle/ufps/10382TIB V00102/2024El presente trabajo de investigación tiene como objetivo principal evaluar la eficacia de diferentes posibles sustitutos del suero fetal bovino (SFB) para estabilizar la acción de la tripsina en un protocolo de bandeo G convencional. El SFB se usa ampliamente en este protocolo para inhibir la tripsina de forma competitiva y lograr un bandeo cromosómico estable y de alta calidad. Sin embargo, el SFB tiene varias limitaciones como su alto costo, limitada disponibilidad y cuestionamientos éticos relacionados con su obtención. Se exploraron mediante ensayos experimentales varios sustitutos potenciales como leche pasteurizada de vaca, leche en polvo preparada, bebida de Soja, Fitohemaglutinina y variaciones en pH y temperatura. Se evaluó su capacidad para inhibir la tripsina comparándola con las bandas obtenidas usando SFB como punto de referencia. Los resultados muestran que la leche pasteurizada y en polvo logran inhibir la tripsina de forma comparable al SFB, obteniendo bandas estables y de alta calidad similares. En contraste, las variaciones de pH y temperatura, así como los extractos vegetales comerciales no lograron una inhibición efectiva. Este trabajo permite concluir que la leche puede ser un sustituto viable del SFB en protocolos de bandeo G, aportando una alternativa más económica y ética.PregradoIngeniero(a) Ambiental72 páginas. ilustraciones, (Trabajo completo) 1.389 KBapplication/pdfspaUniversidad Francisco de Paula SantanderFacultad de Ciencias Agrarias y del AmbienteSan José de CúcutaIngeniería Ambientalhttps://catalogobiblioteca.ufps.edu.co/cgi-bin/koha/opac-retrieve-file.pl?id=70c701c34a60be54d443ee469920852bEvaluación de sustitutos del suero fetal bovino para estabilizar la acción de la tripsina en un protocolo de bandeo g convencionalTrabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_46echttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Textinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttp://purl.org/redcol/resource_type/TPinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionAdayabalam, B., & Prakash, H. (2018). Historia y evolución de las técnicas citogenéticas: Aplicaciones actuales y futuras en investigación básica y clínica. Mutation Research/Genetic Toxicology and Environmental Mutagenesis, vol.836 Part. A, 03-12. Obtenido de https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S1383571818302237Afiler, M. (2017). Cariotificación en recién nacidos con anomalías congénitas atendidos en el hospital Victor Lazarte Echegaray de Trujillo, de abril a septiembre del 2015. Tesis doctoral, Universidad Nacional de Trujillo. Obtenido de http://dspace.unitru.edu.pe/bitstream/handle/UNITRU/7767/Tesis%20DoctoradoX%20- %20Mirtha%20Yanina%20Afiler%20Horna.pdf?sequence=1&isAllowed=yAldabe, J., Hueto, A., Juni, J., & López, P. (1998). Las enzimas. En Biología (pág. 128). Erein.Barrero, J., Cruz, C., Casallas, J., & Vasquez, J. (2020). Evaluación in silico de péptidos bioactivos derivados de la digestión de proteínas presentes en la leche de bovino (B. taurus), oveja (O. aries), cabra (C. hircus) y búfalo (B. bubalis). TecnoLógicas vol.24 no.50. Obtenido de https://www.redalyc.org/journal/3442/344264813025/html/Becerra, J., & López, J. (2019). Citogenética del cáncer; alteraciones cromosómicas útiles para diagnóstico oportuno y pronóstico en neoplasias linfoproliferativas. Revista de la Facultad de Ciencias Universidad Nacional de Colombia vol.9 no.1. Obtenido de https://revistas.unal.edu.co/index.php/rfc/article/view/74595/73885Benasayag, S., & Gallino, M. (2010). Bases citogenéticas para la práctica hematológica De lo supuesto a lo expuesto en nomenclatura citogenética. HEMATOLOGIA vol.14 no.2, 58- 68. Obtenido de http://www.sah.org.ar/docs/sah2-4.pdfBrunser, O. (2018). Avances en el conocimiento de las proteínas de la leche materna. Rev. chilena de pediatria vol.89 no.2, 261-269. Obtenido de https://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0370-41062018000200261Bueno, M. (2011). Cromosomas, vehiculos en la organización y transmisión de los caracteres. Acta biológica Colombiana vol.16 no.3, 43-60. Obtenido de http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0120-548X2011000300003Calasanz, M. (2009). Revisión de técnicas de citogenética convencional y molecular y su implicación en el diagnóstico y pronóstico del cáncer. Anales Del Sistema Sanitario De Navarra vol.24, 17-29. Obtenido de https://recyt.fecyt.es/index.php/ASSN/article/view/5833Calderon de la Barca, A. M., Wall, A., Jara, M., Gonzalez, A., & Ruiz, A. (2000). Modificación enzimática de las propiedades funcionales, nutricias y sensoriales de la soya para alimentación especial. Archivos Latinoamercanos de Nutrición vol.50 n.1, 26-32. Obtenido de https://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0004- 06222000000100003cientifica SENNA. (s.f.). Tripsina. Obtenido de https://www.cientificasenna.com/producto/tripsina/#:~:text=A%20trav%C3%A9s%20de %20la%20tripsinizaci%C3%B3n,temperatura%20de%2037%C2%B0CClementea, A., & Domoney, C. (2006). Biological significance of polymorphism in legume protease inhibitors from the Bowman-Birk family. Current protein & peptide science, 201-216. Obtenido de https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16787260/Cox, M., & Nelson, D. (2008). Lehninger Principles of Biochemistry. OMEGA.Delgado, M. D. (2009). Modificaciones de la cromatina, regulación génica y cáncer. Monografías de la Real Academia Nacional de Farmacia, 139-275. Obtenido de https://core.ac.uk/reader/230316712Dominguez, U. (2015). Sitio Argentino de Producción Animal. Obtenido de Antimicrobianos en el calostro bovino: https://www.produccionanimal.com.ar/produccion_bovina_de_leche/cria_artificial/72- Antimicrobianos_en_calostro.pdfDoucet, C., Ernou, I., Zhang, Y., Jean-Roch, L., Begot, L., & Santo, J. (2005). Platelet lysates promote mesenchymal stem cell expansion: a safety substitute for animal serum in cellbased therapy applications. Journal of cellular physiology, vol.205 no.2, 228-236Drets, M. (2002). Una saga citogenética: El descubrimiento de los métodos de bandeo cromosómico. Significado y proyección bio-médica. Rev. Méd. Urug. vol.18 no.2, 107- 121. Obtenido de http://www.scielo.edu.uy/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1688- 03902002000200003Esparza, E., Cardenas, A., Huicochea, J. C., & Araujo, M. (2017). Cromosomas, cromosomopatías y su diagnóstico. Rev. Mexicana de Pediatría vol.84 no.1, 30-39. Obtenido de https://www.medigraphic.com/pdfs/pediat/sp-2017/sp171g.pdfEUGENOMIC. (2020). Obtenido de Inhibidor enzimático: https://eugenomic.com/recursos/glosario/inhibidor/Frómeta, A., Sánchez, S., Maya, M., Jara, J., & Valarezo, D. (2017). El método Clínico: Perspectivas actuales. Bionatura vol.2 no.1, 255-260. Obtenido de https://www.revistabionatura.com/2017.02.01.8.htmlGaleano, L., Benavides, A., & Bejarano, D. (2019). Optimización del cultivo de linfocitos para obtención de cromosomas y analisis de fragilidad: Importancia en X fragil y deficit cognitivo. Obtenido de Repositorio UNICOLMAYOR: https://repositorio.unicolmayor.edu.co/bitstream/handle/unicolmayor/3706/INFORME%2 0FINAL-3-77.pdf?sequence=3Garcia, C. (2014). Inhibidores de proteasas en leguminosas. Tesis titulación, Universidad de Valladolid. Obtenido de https://uvadoc.uva.es/bitstream/handle/10324/7486/TFG-MN170.pdf?sequence=1&isAllowed=yGarcía, J. d. (2019). Desde la Genética Médica hacia la Medicina Genómica. Rev. de investigación y educación en ciencias de la salud vol.4 no.1, 20-32. Obtenido de https://riecs.es/index.php/riecs/article/view/137Garcia, L., & Gallardo, L. (2007). Evaluación de la absorción y metabolismo intestinal. Nutr. Hosp. vol.22 suppl.2, 05-13. Obtenido de https://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0212- 16112007000500002&lng=enGenética, S. U. (2022). Guia de procedimiento: Cariotipo - Banda GTG en médula ósea. Perú.Gersen, S., & Keagle, M. (2005). The Principles of Clinical Cytogenetics (Second Edition ed.). Humana Press.Gomez, F., & Hernandez, B. (2015). Biología molecular y citogenética. Barcelona: AltamarGonzález, S., & Lavaut, K. (2022). Técnicas de citogenética para el estudio de las leucemias. Rev Cubana Hematol Inmunol Hemoter vol.38 no.2, Epub 01. Obtenido de http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-02892022000200002Hernandez, J. (2003). Aislamiento, clonación y secuenciación de secuencias que codifican para inhibidores KAZAL en el camarón blanco. Tesis maestria, Centro de investigaciones biológicas del Noroeste. Obtenido de https://cibnor.repositorioinstitucional.mx/jspui/bitstream/1001/497/1/hernandez_j.pdfHuang, H.-L., Hsing, H.-W., & Chen, Y.-W. (2010). Trypsin-induced proteome alteration during cell subculture in mammalian cells. Journal of Biomedical Science 17, 36. Obtenido de https://jbiomedsci.biomedcentral.com/articles/10.1186/1423-0127-17-36#citeasJochems, C. E., Van Der Valk, J. B., Stafleu, F. R., & Baumans, V. (2002). The use of fetal bovine serum: ethical or scientific problem? Alternatives to laboratory animals : ATLA, vol,30 no.2, 219-227. Obtenido de https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11971757/Keil, B. (1992). Specificity of Proteolysis. Springer Berlin. Obtenido de https://link.springer.com/book/10.1007/978-3-642-48380-6Khan Academy. (s.f.). Cromosomas. Obtenido de https://es.khanacademy.org/science/biology/cellular-molecular-biology/intro-to-celldivision/a/dna-and-chromosomes-articleKhan Academy. (s.f.). Regulación enzimática. Obtenido de https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/cellular-energetics/environmentalimpacts-on-enzyme-function/a/enzyme-regulationLaboratorium Discounter. (s.f). Tripsina. Obtenido de https://www.laboratoriumdiscounter.nl/es/quimicos/a-z/t/tripsina/Larripa, I. (2011). Citogenética humana: del microscopio al microchip. HEMATOLOGIA, vol.15 no.2, 27-34. Obtenido de https://sah.org.ar/revistasah/numeros/vol15.n2.27-34.pdfMarchbank, T., Weaver, G., Nilsen-Hamilton, M., & Playford, R. (2009). Pancreatic secretory trypsin inhibitor is a major motogenic and protective factor in human breast milk. American journal of physiology. Gastrointestinal and liver physiology, 697-703. Obtenido de https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19147803/mayimex, S.A. (s.f.). Suero fetal bovino. Obtenido de https://mayimex.com/suero-fetal-bovinio/MERCK. (s.f.). FBS, suero bovino fetal. Obtenido de https://www.sigmaaldrich.com/CO/es/products/cell-culture-and-analysis/cell-culturesupplements-and-reagents/fbsMERCK. (s.f.). Tripsina from porcine pancreas. Obtenido de https://www.sigmaaldrich.com/CO/es/product/sigma/93614Morillo, A. E. (2020). Estandarización de los protocolos para determinar las características cariotípicas y daño al ADN en células de cáncer de tiroides mediante cariotipaje y ensayo cometa. Tesis titulación, Universidad de las Fuerzas Armadas ESPE. Obtenido de http://repositorio.espe.edu.ec/bitstream/21000/23152/1/T-ESPE-044091.pdfMüller-Esterl, W. (2008). Bioquímica: Fundamentos para medicina y ciencias de la vida. Reverté.nutriNews. (2022). ¿Qué son los factores antinutricionales de los alimentos? Obtenido de https://nutrinews.com/breve-repaso-por-los-factores-antinutricionales-de-los-alimentos/Ortega Torres, M., Torres, J., & Osorio, J. (2018). Fundamentos de citogenética humana y animal. Sello Editorial UNAD. Obtenido de https://hemeroteca.unad.edu.co/index.php/book/article/view/4119/4121Quicazán, M., & Caicedo, L. (2012). Inactivación del inhibidor de tripsina durante el tratamiento térmico de bebidas de soya. Vitae, 337-339. Obtenido de https://www.redalyc.org/pdf/1698/169823914105.pdfQUIMICA.ES . (s.f.). Obtenido de Inhibidor enzimático: https://www.quimica.es/enciclopedia/Inhibidor_enzim%C3%A1tico.html#_note-12/QuimiNet. (2008). ¿Cómo se produce el suero fetal bovino (SFB)? Obtenido de https://www.quiminet.com/articulos/como-se-produce-el-suero-fetal-bovino-sfb27577.htmRomo Espinosa, B. (2023). Estandarización de cultivos celulares adherentes en cultivos en suspensión mediante el uso de microportadores. Proyecto de investigación. Obtenido de https://repositorio.xoc.uam.mx/jspui/bitstream/123456789/37900/2/250518.pdfRyan, B., & Henehan, G. (2016). Avoiding Proteolysis During Protein Purification. Protein Chromatography, 53-69. Obtenido de https://link.springer.com/protocol/10.1007/978-1- 4939-6412-3_4Salamanca Gomez, F. (1990). Citogenetica humana , fundamentos y aplicaciones clinicas , 1990 , 400 p. Médica Panamericana.Schwarz, C., Leicht, U., Rothe, C., Drosse, I., Volker, L., Rocken, M., & Schieker, M. (2012). Effects of different media on proliferation and differentiation capacity of canine, equine and porcine adipose derived stem cells. Research in veterinary science, vol.93 no.1, 457- 462. Obtenido de https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21940026/Silva, Crane, Bermudez, & Bueno. (1991). Citogenética Humana: Manual de procedimientos. Imprenta del Instituto Nacional de Salud.Simancas Escorcia, V., Vergara Hernandez, C., & Diaz Caballero, A. (2018). Influencia del suero fetal bovino en el cultivo de fibroblastos gingivales. Avances en Odontoestomatología vol.34 no.6, 299-309. Obtenido de https://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0213-12852018000600004Soriano Torres, M., & Arencibia, R. (2010). Estudio bibliométrico de la citogenética humana en el período 1999-2008. ACIMED vol.21 no.4, 403-412. Obtenido de http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1024-94352010000400004Standford Medicine Children's Health. (s.f.). Genética. Obtenido de https://www.stanfordchildrens.org/es/topic/default?id=gen-tica-90-P05560Timberlake, K. (2013). Química general, orgánica y biológica: estructuras de la vida. Mñexico: Pearson Education.Tineo de Rumbos, E. C. (2016). Citogenética de triatominos: una herramienta útil para la enseñanza de la meiosis en el laboratorio de genética. Revista de Investigación vol.40 no.89, 90-104. Obtenido de http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1010- 29142016000300005Tipathi, S., & Das, K. (1991). Studies on the digestive enzymes of grass carp, Ctenopharyngodon idella (Val.) Vol.92. En Aquaculture (págs. 21-32).Van Der Valk, J. B., Bieback, K., Buta, C., Cochrane, B., Dirks, W. G., & Jienan, F. (2018). Fetal Bovine Serum (FBS): Past - Present - Future. ALTEX, vol.35 no.1, 99-118. Obtenido de https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28800376/Vargas, J. (2021). Caseina: la proteina de la leche. Obtenido de ipf: https://ipf.com.co/caseinala-proteina-de-la-leche/Villaverde, N. (2000). La citogenética molecular en el año 2000. Rev. Med Univ Navarra vol.43 no.4,1999, 7-10. Obtenido de https://revistas.unav.edu/index.php/revista-demedicina/article/download/6690/5872Suero fetal bovinoEnzimasInhibidorTripsinaSuero fetal bovinoEnzimaInhibidorBandeo G.Publicationf3406f5c-0c63-489b-a661-03c793bf4f54virtual::20-139010336-69cf-4dd0-9cdf-60247e3cff69virtual::21-1f3406f5c-0c63-489b-a661-03c793bf4f54virtual::20-139010336-69cf-4dd0-9cdf-60247e3cff69virtual::21-1ORIGINALTG_1611470.pdfTG_1611470.pdfProyecto de pregradoapplication/pdf1421750https://repositorio.ufps.edu.co/bitstreams/10ee36ae-c4c6-4684-8ced-52be77b41297/download86f5057e872e46f7f4b2a1c6a594f5aaMD51trueAnonymousREADLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-814837https://repositorio.ufps.edu.co/bitstreams/da3c26e9-5a1b-4b18-bb33-62d8821acee2/downloadb76e7a76e24cf2f94b3ce0ae5ed275d0MD52falseAnonymousREADTEXTTG_1611470.pdf.txtTG_1611470.pdf.txtExtracted texttext/plain101499https://repositorio.ufps.edu.co/bitstreams/ce904052-b262-4213-a4c5-10ae0cfd6b7e/downloada97903fb94b8f7e33c5944e731587e0dMD53falseAnonymousREADTHUMBNAILTG_1611470.pdf.jpgTG_1611470.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg15078https://repositorio.ufps.edu.co/bitstreams/639d50c1-7cb1-430b-8f23-6ef013f23665/downloadb986b3765d220cfd60f9c84d5329548cMD54falseAnonymousREADufps/10382oai:repositorio.ufps.edu.co:ufps/103822025-10-21 04:00:51.523https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/Derechos Reservados Universidad Francisco de Paula Santander, 2024open.accesshttps://repositorio.ufps.edu.coRepositorio Universidad Francisco de Paula Santanderbdigital@metabiblioteca.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 |
