Identificación de compuestos con aplicación farmacológica para el tratamiento del huanglongbing de los cítricos: enfoque computacional y experimental
El Huanglongbing (HLB) es la enfermedad más devastadora que afecta a la industria citrícola a nivel mundial. En Latinoamérica, el agente causal del HLB es la bacteria Candidatus Liberibacter asiaticus (C. Las). Este estudio utilizó herramientas computacionales para identificar compuestos que inhiban...
- Autores:
-
Molina González, Duván Alveiro
Ramírez Osorio, Ronald Alberto
- Tipo de recurso:
- Tesis
- Fecha de publicación:
- 2024
- Institución:
- Universidad Francisco de Paula Santander
- Repositorio:
- Repositorio Digital UFPS
- Idioma:
- OAI Identifier:
- oai:repositorio.ufps.edu.co:ufps/10381
- Acceso en línea:
- https://repositorio.ufps.edu.co/handle/ufps/10381
- Palabra clave:
- Dinámica molecular
Antibiograma
Antibiograma
Candidatus Liberibacter Asiaticus (C. Las)
Cribado virtual
Dinámica molecular
Huanglongbing
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- openAccess
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- Atribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0 Internacional (CC BY-NC-SA 4.0)
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El Huanglongbing (HLB) es la enfermedad más devastadora que afecta a la industria citrícola a nivel mundial. En Latinoamérica, el agente causal del HLB es la bacteria Candidatus Liberibacter asiaticus (C. Las). Este estudio utilizó herramientas computacionales para identificar compuestos que inhiban enzimas cruciales para el crecimiento de C. Las. Se identificó como una diana prometedora la Timidilato quinasa. Se generó un modelo tridimensional de esta enzima utilizando el servidor SwissModel y Alphafold2. Se valido la calidad estructural y estereoquímica de los modelos. Se realizó cribado virtual utilizando una biblioteca de compuestos naturales en DockThor . para identificar candidatos potenciales para la inhibición de la Timidilato quinasa. Los ensayos de Dinámica Molecular mostraron que los compuestos ZINC52509366 ZINC70466416 y ZINC1550477 alcanzaron el equilibrio. Por su parte, para el ligando ZINC36701290, el tiempo de simulación pudo no ser suficiente para alcanzar el equilibrio. Experimentalmente, el compuesto ZINC1550477 mostró una actividad inhibitoria moderada en ensayos de antibiogramas Este estudio resalta la importancia de los análisis computacionales para el desarrollo de estrategias efectivas que permitan la identificación de compuestos con potencial actividad antimicrobiana para el tratamiento de fitopatógenos de interés agronómico como C. Las. |
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Se generó un modelo tridimensional de esta enzima utilizando el servidor SwissModel y Alphafold2. Se valido la calidad estructural y estereoquímica de los modelos. Se realizó cribado virtual utilizando una biblioteca de compuestos naturales en DockThor . para identificar candidatos potenciales para la inhibición de la Timidilato quinasa. Los ensayos de Dinámica Molecular mostraron que los compuestos ZINC52509366 ZINC70466416 y ZINC1550477 alcanzaron el equilibrio. Por su parte, para el ligando ZINC36701290, el tiempo de simulación pudo no ser suficiente para alcanzar el equilibrio. Experimentalmente, el compuesto ZINC1550477 mostró una actividad inhibitoria moderada en ensayos de antibiogramas Este estudio resalta la importancia de los análisis computacionales para el desarrollo de estrategias efectivas que permitan la identificación de compuestos con potencial actividad antimicrobiana para el tratamiento de fitopatógenos de interés agronómico como C. Las.Contenido Pág. 1 Introducción 18 2 Planteamiento del Problema 20 3 Objetivos 23 3.1 Objetivo general 23 3.2 Objetivos específicos 23 4 Justificación 24 5 Delimitación 26 5.1 Alcance 26 5.2 Limitaciones 26 6. Marco Referencial 28 6.1 Antecedentes 28 6.2 Estado Actual y Tecnológico 29 6.3 Marco Teórico 31 6.3.1 Citricultura 31 6.3.2 Huanglongbing de los cítricos 32 6.3.3 Vector del Huanglongbing: Diaphorina citri 35 6.3.4 Descripción de la bacteria Candidatus Liberibacter 38 6.3.5 Desarrollo del HLB en el hospedero 39 6.3.6 Bioinformática 40 6.3.7 Objeticos de desarrollo sostenible (ODS) 52 6.7 Marco Legal 54 6.8 Marco Conceptual 55 7. Metodología 59 7.1 Revisión de Enzimas con Función Esencial 59 7.2 Determinación de Potenciales Dianas Terapéuticas Mediante Evaluación de Homología con Hospedero (Rutaceae) y Plantillas de Estructuras Tridimensionales PDB 59 7.3 Modelado Basado en Estructura 60 7.4 Validación de la Calidad del Modelo 3D de la Proteína 61 7.5 Localización del Centro Activo y Determinación de Coordenadas 62 7.6 Acoplamiento y cribado virtual 62 7.7 Dinámica Molecular 63 7.8 Ensayos de Antibiogramas 64 8. Resultados 66 8.1 Identificación de Genes que Codifican Proteínas con Funciones Esenciales en la Bacteria Candidatus Liberibacter asiaticus Como Potenciales Dianas Farmacológicas 66 8.2 Modelado basado en estructura y aprendizaje automático (ML) de la diana Timidilato quinasa de la bacteria C. Las 70 8.2.1 Predicción por SWISS-MODEL 70 8.2.1 Predicción por alphafold2 71 8.3 Validación de Estructuras Tridimensionales y selección de Diana terapéutica 73 8.4 Localización del centro activo y determinación de coordenadas 77 8.5 Acoplamiento y Cribado Virtual 79 8.5.1 Análisis de interacciones proteína-ligando 83 8.6 Análisis de Trayectoria de Dinámica Molecular 90 8.6.1 Estabilidad estructural complejos Timidilato quinasa/ligandos 91 8.6.2 RMSF de complejos Timidilato quinasa y ligandos 95 8.6.3 Análisis de histogramas y mapas de calor 100 8.7 Análisis in vitro de la capacidad inhibitoria de los ligandos ZINC52509366, ZINC1550477 y ZINC70466416 contra la enzima Timidilato quinasa 111 9. Conclusiones 118 10. Recomendaciones 121 11. Referencias Bibliográficas 122 12. Anexos 146PregradoQuímico Industrial158 páginas. ilustraciones, 2.642 KBhttps://catalogobiblioteca.ufps.edu.co/cgi-bin/koha/opac-retrieve-file.pl?id=ac215beaad8a85da269e61f45bb55477Identificación de compuestos con aplicación farmacológica para el tratamiento del huanglongbing de los cítricos: enfoque computacional y experimentalTrabajo de grado - Pregradohttp://purl.org/coar/resource_type/c_46echttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fhttp://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85Textinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttp://purl.org/redcol/resource_type/TPinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionFacultad de Ciencias BásicasSan Jose de CúcutaQuímica IndustrialDinámica molecularAntibiogramaAntibiogramaCandidatus Liberibacter Asiaticus (C. 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