Evaluación de la Actividad Antibacteriana de Nanopartículas de Plata Sintetizadas con Extractos de Moringa oleífera Contra Bacterias Causantes de Infecciones Asociadas a la Atención en Salud
Digital
- Autores:
-
Vargas-Caicedo, José David
- Tipo de recurso:
- Fecha de publicación:
- 2025
- Institución:
- Universidad de Santander
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En el marco de este estudio se evaluó la actividad antibacteriana sobre bacterias del grupo ESKAPE mediante el protocolo M07 ed. 4 del CLSI para la determinación de concentraciones mínimas inhibitorias (CMI). La concentración bactericida mínima (CBM) fue evaluada a través de subcultivo en agar Mueller-Hinton. Así mismo, el efecto inhibitorio de la formación de biopelículas fue determinado según Madilyn Fletcher. Adicional, se estableció el efecto citotóxico sobre fibroblastos murinos NIH/3T3 usando técnica MTT. Finalmente, interacciones farmacológicas in vitro usando el método del tablero de ajedrez entre NPAgs y soluciones de referencia fueron evaluadas. Los resultados indican un 60% de NPAgs bioactivas contra los microorganismos estudiados (CMI <50 µg/mL). En cuanto al efecto inhibitorio sobre biopelículas, la NPAg 7 redujo significativamente el 46% al 86% de la formación de biopelículas de 3 de las especies bacterianas evaluadas. Las NPAgs no presentaron efectos citotóxicos (CC50 >100 µg/mL). Así mismo, interacciones sinérgicas entre la NPAg 7 y Citrilac® frente a S. aureus y A. baumannii fueron identificadas. En adición, la interacción sinérgica entre la NPAg 7 y Citrilac® inhibió la formación de biopelículas de S. aureus y A. baumannii en un 20% a 73%, respectivamente. Los resultados en el presente trabajo permiten evidenciar el potencial de NPAgs para su uso en futuros estudios a nivel de superficies abióticas usadas en ambientes hospitalarios.Healthcare-Associated Infections (HAIs) pose a significant public health challenge, impacting 5–15% of all hospitalized patients. Considering this situation, novel antiseptic approaches such as silver nanoparticles warrant exploration. This study aimed to determine the antibacterial and cytotoxic effects of silver nanoparticles synthesized with Moringa oleifera extracts against bacteria causing healthcare-associated infections and mammalian cells. Antibacterial activity was assessed against ESKAPE group bacteria following CLSI protocol M07 4th edition, to determine minimum inhibitory concentrations (MICs). Minimum bactericidal concentration (MBC) was evaluated through subculturing on Mueller-Hinton agar. Additionally, the biofilm formation inhibitory effect was determined according to Madilyn Fletcher’s method. Cytotoxic effects on murine NIH/3T3 fibroblasts were assessed using the MTT assay. Finally, in vitro pharmacological interactions between AgNPs and reference solutions were evaluated using the checkerboard method. Results indicate that 60% of the AgNPs exhibited bioactivity against the microorganisms studied (MIC < 50 µg/mL). Regarding the inhibitory effect on biofilms, AgNP 7 significantly reduced biofilm formation by 46% to 86% in three of the evaluated bacterial species. The AgNPs showed no cytotoxic effects (CC50 >100 µg/mL). Additionally, synergistic interactions between AgNP 7 and Citrilac® against S. aureus and A. baumannii were identified. Moreover, the synergistic interaction between AgNP 7 and Citrilac® inhibited biofilm formation in S. aureus and A. baumannii by 20% and 73%, respectively. The findings from this study highlight the potential of AgNPs for future applications on abiotic surfaces used in hospital settings.MaestríaMagíster en Investigación en enfermedades InfecciosasUniversidad de SantanderNanotecnologíaIntroducción 22 Infecciones Asociadas a la Atención en Salud 24 Clasificación de las IAAS 27 Infecciones Asociadas a Dispositivo Biomédico 27 Infección de Tracto Urinario Asociada al Uso de Catéter. 27 Neumonía Asociada a Ventilador Mecánico. 29 Infección de Tracto Sanguíneo Asociadas al uso de Catéter. 31 Infección del Sitio Quirúrgico 34 Impacto Económico 36 Microorganismos Implicados en IAAS 37 Escherichia coli 37 Staphylococcus aureus 39 Klebsiella pneumoniae 41 Acinetobacter baumannii 43 Pseudomonas aeruginosa 45 Enterococcus faecium 48 Mecanismos de Formación de Biopelículas Polimicrobianas 50 Inhibición de la Formación de Biopelículas 54 Nanobiotecnología 56 Nanobiotecnología en la Terapéutica 56 Nanopartículas Metálicas 57 Nanopartículas de Plata. 57 Moringa oleífera y su Papel en la Síntesis de Nanopartículas de Plata 62 Objetivos 67 Objetivo General 67 Objetivos Específicos 67 Metodología 68 Materiales 68 Microorganismos 68 Línea Celular de Mamífero 68 Compuestos 68 Procedimientos 69 Tamizaje de la Actividad Antibacteriana 69 Determinación de la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) por Método de Microdilución en Placa 70 Evaluación de la Concentración Mínima Bactericida (CMB) 70 Evaluación de Interacciones Farmacológicas in Vitro por Método de Tablero de Ajedrez 71 Determinación del efecto de Inhibición de Formación de Biopelículas 73 Evaluación del Efecto Citotóxico Sobre Células de Mamífero 74 Análisis de los Datos 75 Resultados 77 Tamizaje de la Actividad Antibacteriana de NPAgs Biosintetizadas con Extractos de M. oleífera Sobre Bacterias Implicadas en IAAS 77 Determinación de la CMI y CMB de Compuestos Frente a Bacterias Implicadas en IAAS 78 Determinación de Interacciones Farmacológicas 79 Determinación del Efecto Anti-Biopelículas de Compuestos Bioactivos 85 Efecto Sobre la Inhibición de la Formación de Biopelículas de E. coli ATCC® 25922 85 Efecto Sobre la Inhibición de la Formación de Biopelículas de S. aureus ATCC® 25923 86 Efecto Sobre la Inhibición de la Formación de Biopelículas de K. pneumoniae ATCC® 10031 87 Efecto Sobre la Inhibición de la Formación de Biopelículas de A. baumannii ATCC® 19606 88 Efecto Sobre la Inhibición de la Formación de Biopelículas de P. aeruginosa ATCC® 27853 88 Efecto Sobre la Inhibición de la Formación de Biopelículas de E. faecium ATCC® BAA-2127 89 Determinación del Efecto Citotóxico de Soluciones Bioactivas Sobre Células de Mamífero 90 Discusión 91 Conclusiones 103 Referencias Bibliográficas 104 Apéndices 128130 papplication/pdfapplication/mswordUniversidad de SantanderT 86.25 V173mRepositorio Digital Universidad de Santanderhttps://repositorio.udes.edu.cohttps://repositorio.udes.edu.co/handle/001/11961spaUniversidad de SantanderBucaramangaFacultad de Ciencias Médicas y de la SaludBucaramanga, ColombiaMaestría en Investigación en enfermedades InfecciosasDe la Rosa-Zamboni D, Ochoa SA, Laris-González A, Cruz-Córdova A, Escalona-Venegas G, Pérez-Avendaño G, et al. Everybody hands-on to avoid ESKAPE: effect of sustained hand hygiene compliance on healthcare-associated infections and multidrug resistance in a paediatric hospital. J Med Microbiol. 2018;67(12):1761-71.Venkateswaran P, Vasudevan S, David H, Shaktivel A, Shanmugam K, Neelakantan P, et al. Revisiting ESKAPE Pathogens: virulence, resistance, and combating strategies focusing on quorum sensing. Front Cell Infect Microbiol [Internet]. 29 de junio de 2023 [citado 21 de abril de 2024];13. Disponible en: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fcimb.2023.1159798Kranz J, Schmidt S, Wagenlehner F, Schneidewind L. Catheter-Associated Urinary Tract Infections in Adult Patients. Dtsch Arzteblatt Int. 7 de febrero de 2020;117(6):83-8.Tesini BL, Dumyati G. Health Care-Associated Infections in Older Adults: Epidemiology and Prevention. Infect Dis Clin North Am. marzo de 2023;37(1):65-86.Sondi I, Salopek-Sondi B. 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Al consultar y hacer uso de este recurso, está aceptando las condiciones de uso establecidas por los autores.https://repositorio.udes.edu.coRepositorio Universidad de 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