Aproximaciones multiómicas para el desarrollo de pruebas diagnósticas para Trypanosoma cruzi

Este trabajo hace parte del macro proyecto “Puesta a punto de una plataforma de producción de proteínas recombinantes para desarrollo de pruebas diagnósticas” financiado por Minciencias y realizado durante los años 2020-2022 en el Instituto Colombiano de Medicina Tropical (ICMT), Universidad CES. La...

Full description

Autores:
Barón Vera, Juan Pablo
Sanchez Jiménez, Miryan Margot
Ospina Villa, Juan David
Tipo de recurso:
Fecha de publicación:
2023
Institución:
Universidad CES
Repositorio:
Repositorio Digital - Universidad CES
Idioma:
spa
OAI Identifier:
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Acceso en línea:
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Palabra clave:
Chagas
Aptameros
Trypanosoma cruzi
Prueba diagnostica
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description Este trabajo hace parte del macro proyecto “Puesta a punto de una plataforma de producción de proteínas recombinantes para desarrollo de pruebas diagnósticas” financiado por Minciencias y realizado durante los años 2020-2022 en el Instituto Colombiano de Medicina Tropical (ICMT), Universidad CES. La metodología descrita en este trabajo fue realizada en Baltymas Lab-ICMT, nombre del laboratorio de producción de proteínas recombinantes. Para llevar a cabo esta parte del proyecto titulada: Aproximaciones multiómicas para el desarrollo de pruebas diagnósticas para Trypanosoma cruzi, se utilizaron dos estrategias para el diseño y desarrollo de pruebas diagnósticas para la enfermedad de Chagas:
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Para llevar a cabo esta parte del proyecto titulada: Aproximaciones multiómicas para el desarrollo de pruebas diagnósticas para Trypanosoma cruzi, se utilizaron dos estrategias para el diseño y desarrollo de pruebas diagnósticas para la enfermedad de Chagas:Introducción: La Organización Mundial de la Salud (OMS) indica que aproximadamente el 90% de las personas infectadas por Trypanosoma cruzi (Enfermedad de Chagas) no reciben un diagnóstico oportuno por causas como falta de disponibilidad de las pruebas, variabilidad inter pruebas y grupo del parásito con el que se fabrica la prueba; causando que los pacientes no reciban tratamiento adecuado. Objetivo: Desarrollar prototipos de pruebas diagnósticas para la enfermedad de Chagas basada en proteínas recombinantes de una cepa colombiana de T. cruzi, que permitan un diagnóstico de alta sensibilidad y especificidad. Materiales y métodos: Se realizó un sondeo bioinformático del proteoma de T. cruzi CL Brener en la base de datos KEGG para identificar las proteínas más antigénicas y solubles; se diseñaron cebadores modificados según las necesidades del cromatógrafo, se extrajo DNA de Trypanosoma cruzi cepa Medellín Tc Ia ,se clonaron los genes en el vector pMiniT2.0 usando como hospedero final las células de Escherichia coli BL21; se purificaron las proteínas por medio de cromatografía de afinidad Histaq, se diseñaron pruebas tipo ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) e Inmunoblot y se validaron realizando pruebas a muestras humanas. Se determinaron los valores de Sensibilidad, Especificidad, Valor Predictivo Positivo y Negativo de las pruebas. Resultados: La prueba de Inmunoblot presentó mejor sensibilidad y especificidad que la prueba de ELISA. Conclusión: El Inmunoblot fue la prueba de mejor desempeño, es de fácil realización, no requiere equipo especializado, es de lectura visual y presenta una utilidad potencial para el diagnóstico de la enfermedad de Chagas en nuestro país.Este trabajo hace parte del macro proyecto “Puesta a punto de una plataforma de producción de proteínas recombinantes para desarrollo de pruebas diagnósticas” financiado por Minciencias y realizado durante los años 2020-2022 en el Instituto Colombiano de Medicina Tropical (ICMT), Universidad CES. La metodología descrita en este trabajo fue realizada en Baltymas Lab-ICMT, nombre del laboratorio de producción de proteínas recombinantes.spaUniversidad CESChagasAptamerosTrypanosoma cruziPrueba diagnosticaAproximaciones multiómicas para el desarrollo de pruebas diagnósticas para Trypanosoma cruziTrabajo de Gradoinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesishttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1finfo:eu-repo/semantics/closedAccessinfo:eu-repo/semantics/closedAccesshttp://purl.org/coar/access_right/c_14cbhttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fORIGINALNo autoriza difusion.pdfNo autoriza difusion.pdfNo autoriza difusiónapplication/pdf214981https://repository.ces.edu.co/bitstreams/e2b3f16f-255e-451e-a06a-67a458683cc1/download93c7bbae2f5ac2f288ae13eee2f47d08MD54Aproximaciones multiómicas para el desarrollo de pruebas diagnósticas para Trypanosoma cruzi.pdfAproximaciones multiómicas para el desarrollo de pruebas diagnósticas para Trypanosoma cruzi.pdfTrabajo de 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